GB/T 14926.14-2001 实验动物 金黄色葡萄球菌检测方法

范围

本标准规定了实验动物金黄色葡萄球菌的检测方法。本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和免金黄色葡萄球菌的检测

引用标准

下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

GB/T14926.42-2001实验动物细菌学检测标本采集

GB/T 14926.43-2001实验动物 细菌学检测染色法、培养基和试剂

4原理

金黄色葡萄球菌是革兰阳性球菌,具有特定的菌落形态、溶血性和生化反应特征。据此可与其他细菌区别。

4 主要设备和材料

4.1普通恒温培养箱。

4.2生物显微镜。

4.3 恒温水浴箱

5培养基和试剂

5.1高盐甘露醇琼脂平皿(SP)。

5.2血琼脂平皿。

5.3普通肉汤。

5.4甘露醇发酵管

5.5正常免血浆。

5.6 已知血浆凝固酶阳性和阴性的葡萄球菌参考菌株各一株。

7 操作步骤

7.1 采样

采取回盲部内容物或病灶组织或病灶分泌物。7.2 分离培养

将已接种的高盐甘露醇培养基置(36士1)℃培养18~24h。7.3 鉴定

7.3.1 菌落特征

高盐甘露醇培养基上形成1mm左右、凸起、黄色的菌落,菌落周围的培养基由红变成黄色。转种血琼脂平皿(36+1)℃培养18~24h形成白色或金黄色、凸起、圆形、不透明,表面光滑、周围有溶血环的菌落。

7.3.2 菌体形态

革兰阳性球菌,排列成葡萄状,无芽胞,无英膜,直径约为0.5~1.0μm。

7.3.3 甘露醇发酵试验阳性。

7.3.4 血浆凝固酶试验

吸取1:4新鲜免血浆或一20℃保存的免血浆0.5m,放入小试管中,再加入待检菌24h肉汤培养物 0.5 ml,摇匀,放(36±1)℃培养箱或水浴内,每30min观察一次,观察6h。同时应用已知的血浆凝固酶阳性和阴性的葡萄球菌菌株及肉汤培养基作对照。当已知的阳性株和待检株均出现凝固时或有凝块时,可判断为阳性。

8结果报告

凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告,不符合者作出阴性报告。