目的 比较苯扎氯铵溶液滴眼、氢溴酸东莨菪碱皮下注射、苯扎氯铵溶液滴眼联合干燥箱培养及单纯干燥箱培养4种方式诱导小鼠干眼模型的异同。
方法 采用随机数表法将50 只SPF级C57BL/ 6J小鼠分为5组。 空白对照组小鼠不予以任何干预;氢溴酸东莨菪碱组小鼠每日采用氢溴酸东莨菪碱溶液皮下注射;苯扎氯铵组小鼠每日予以苯扎氯铵溶液滴眼;干燥箱组小鼠置于干燥环境的可控干燥系统中饲养;苯扎氯铵加干燥箱组小鼠每日予以苯扎氯铵溶液滴眼并置于干燥箱中饲养。 造模前、造模后观测并记录各组小鼠的体质量、体温、行为学变化、基础泪液分泌实验( SIT)、泪膜破裂时间( BUT)、角膜荧光素染色( CFS)、苏木素-伊红( HE)染色观察小鼠角膜泪腺形态;TUNEL染色检测角膜及泪腺组织细胞凋亡情况;RT-qPCR法检测小鼠泪腺中NF-κB、 IL- 1β、 TNF-α等炎症因子表达情况。
结果 与空白对照组相比,苯扎氯铵组在造模后SIT和 BUT有明显降低( P < 0. 01) ,小鼠体温升高( P < 0. 01) ,体质量减轻,细胞凋亡数量增多,炎症因子含量升高( P < 0. 01) ;与空白对照组相比,氢溴酸东莨菪碱组造模后,SIT和BUT有明显降低( P < 0. 01) ,小鼠呈现高度紧张焦躁状态,且全身干燥症状明显,毛发干枯、粪便少而干燥,旷场实验得分升高( P < 0. 05) ,高架十字迷宫实验中OE%和TE%值降低( P < 0. 01) ,炎症因子含量升高( P < 0. 05) ;与空白对照组相比,苯扎氯铵加干燥箱组在造模后体质量增加量减少,体温升高( P < 0. 01) ,SIT和BUT有显著性差异( P < 0. 01) ,角膜损伤严重,泪液分泌显著减少,炎症因子含量升高( P < 0. 05) ;干燥箱组造模后,各项指标与空白对照组相比,差异小。
结论 苯扎氯铵溶液滴眼、氢溴酸东莨菪碱皮下注射及苯扎氯铵加干燥箱培养3种方式均可诱导小鼠干眼模型,单纯干燥箱培养28 d差异无显著性,诱导小鼠干眼模型效果不明显。 氢溴酸东莨菪碱法诱导的干眼小鼠模型全身干燥症状较眼表症状更重,更适合干燥综合征模型的构建;苯扎氯铵溶液滴眼联合干燥箱培养法诱发的小鼠干眼模型更为稳定、持久,干眼眼表临床症状典型,操作可行性高且重复性好,是干眼教学、临床与科研实验较为理想的干眼动物模型复制方法。
