目的 观察比较颌下腺抗原和唾液腺抗原用于诱导干燥综合征(Sjögren syndrome, SS)小鼠模型的建模效果,并与自发性SS模型NOD/LtJ小鼠进行比较,明确两种腺体抗原诱导的SS小鼠模型的表型与免疫特征。
方法 选用成年C57BL/6J小鼠(雌雄各半),分别采用颌下腺抗原和唾液腺抗原联合弗氏佐剂免疫小鼠,诱导建立 SS模型;以PBS联合弗氏佐剂免疫小鼠作为对照。 在第1天和第7天时采用抗原联合弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant, FCA)经小鼠背部皮下多点注射进行免疫诱导,第14天采用抗原联合弗氏不完全佐剂(Freund’s incomplete adjuvant, FIA)经小鼠背部皮下多点注射进行加强免疫诱导。 同时设置雌性NOD/LtJ小鼠为自发性SS模型组,以其背景品系ICR小鼠为对照,进行对比分析。 实验周期为4周,动态监测小鼠体重、饮水量及唾液流量的变化。 在实验终点时收集小鼠各脏器组织与血清样本,称量颌下腺、 胸腺和脾脏重量,计算脏器指数;对颌下腺和脾脏组织进行病理形态学分析;采用ELISA法检测血清中白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)含量;采用实时荧光定量PCR法检测颌下腺组织中SS抗原A(SS type A, SSA)和SS抗原B(SS type B, SSB)的 mRNA表达水平。
结果 与雌性的PBS联合弗氏佐剂对照组相比,颌下腺抗原雌性组小鼠的饮水量明显增加(P< 0.05),唾液分泌量明显减少(P<0.05),颌下腺指数、 胸腺指数和脾脏指数均无明显差异(P>0.05),颌下腺出现灶性淋巴细胞浸润、 脾脏边缘区扩大,血清IL-17水平明显升高(P<0.05),颌下腺组织中SSA/SSB表达水平无明显差异(P>0.05)。与雌性的PBS联合弗氏佐剂对照组相比,唾液腺抗原雌性组小鼠饮水量、 唾液分泌量、 颌下腺指数以及脾脏指数均无明显差异(P>0.05),但胸腺指数明显降低(P<0.01);颌下腺出现轻微炎性细胞浸润和腺体萎缩,脾脏白髓及边缘区略有扩大;血清IL-17水平与颌下腺组织中SSB表达水平均明显升高(P<0.01),颌下腺组织中SSA表达水平无明显变化(P>0.05)。与雄性的PBS联合弗氏佐剂对照组相比,除颌下腺抗原雄性组小鼠出现轻微颌下腺腺体萎缩外,各造模组的其余成模指标均没有明显差异(P>0.05)。与ICR对照组相比, NOD/LtJ模型组小鼠饮水量明显增加(P<0.05),唾液流量明显减少(P<0.01),颌下腺指数和脾脏指数均无明显差异(P>0.05),但胸腺指数明显增大(P<0.05);颌下腺病理灶性浸润明显,脾脏边缘区明显扩大,血清IL- 17水平和颌下腺SSA/SSB表达水平均明显升高(P<0.05)。
结论 颌下腺抗原和唾液腺抗原均能诱导雌性C57BL/ 6J小鼠表现出SS相关特征,而颌下腺抗原诱导的SS相关表型较唾液腺抗原诱导更为明显,但弱于自发性雌性 NOD/LtJ小鼠。 用颌下腺抗原和唾液腺抗原接种雄性C57BL/6J小鼠未能诱导出明显的SS表型。



