目的 观察七味糖脉舒胶囊对 2 型糖尿病小鼠的治疗作用,并基于网络药理学探究其治疗 2 型糖尿病的作用机制。
方法 利用 TCMSP,ETCM 等数据库查询七味糖脉舒胶囊中所有成分及其靶点;利用 OMIM,DrugBank 等数据库搜索 2 型糖尿病的靶点;通过 Venny 2. 1. 0 将 2 型糖尿病与七味糖脉舒胶囊成分的 靶点取交集。 利用 Metascape 网站对交集靶点进行 GO 与 KEGG 通路富集分析。 建立 2 型糖尿病小鼠模型, 设七味糖脉舒胶囊低,中,高剂量组(234,468,936 mg / kg),二甲双胍(MET)组(200 mg / kg)治疗给药干预 2 周,治疗前后测量小鼠体质量,检测空腹血糖。 给药 2 周后,检测空腹胰岛素(insulin,INS);ELISA 检测血清中 炎症因子肿瘤坏死因子-α( tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素-1β( interleukin-1β,IL-1β),白细胞介 素-6(interleukin-6,IL-6),核因子 κB(nuclear factor kappa B,NF-κB),Toll 样受体 4(toll like receptor 4,TLR4)的 含量;苏木素-伊红(HE)染色观察胰岛形态,半胱氨酸蛋白酶 3(cysteine protease 3,Caspase3)和 INS 免疫荧光 检测胰岛细胞的凋亡及胰岛 β 细胞的数量。 Western Blot 检测胰腺组织磷酸化蛋白激酶 B( phosphorylated protein kinase B, p-Akt), 蛋白激酶 B ( protein kinase B, Akt), 磷 酸 化 磷 脂 酰 肌 醇 3-激 酶 ( phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K),磷脂酰肌醇 3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)促凋亡蛋白 bcl2- associated X 蛋白质(bcl2-associated X protein,Bax),抗凋亡蛋白 B 淋巴细胞瘤因子 2(B-cell lymphoma-2,Bcl2) 等蛋白的表达水平。
结果 共筛选出七味糖脉舒胶囊活性成分靶点 1260 个;2 型糖尿病靶点 1205 个。 Venny 交集靶点 312 个,核心靶点涉及 Akt1,TNF,IL-6,TLR4 等;富集分析确定了 240 条 KEGG 通路,其中“ INS 抵 抗”和“PI3K/ Akt 信号通路”是富集到的关键通路。 动物实验结果显示:与模型组相比,七味糖脉舒胶囊和二 甲双胍治疗型给药干预后的血糖,INS 抵抗均显著改善;血清中炎症因子含量降低,胰岛细胞凋亡率显著降 低;胰岛 β 细胞数量显著增加;Bax 表达含量降低,Bcl2 表达含量明显升高,且上调了 p-PI3K,p-Akt 的表达。
结论 七味糖脉舒胶囊可显著降低 2 型糖尿病小鼠血糖水平、恢复 INS 敏感性、减少胰岛细胞凋亡,其机制可 能与激活 PI3K/ Akt 信号通路有关。
