目的 探讨环指蛋白 130(ring finger protein 130,RNF130)对心肌缺血-再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MI/ RI)的影响及可能的机制。
方法 将 C57BL / 6J 雄性小鼠分为 4 组(n = 6):假手 术(Sham)组、模型(MI/ RI)组、心肌缺血-再灌注+空载体质粒(MI/ RI+Vector)组、心肌缺血-再灌注+RNF130 过表达(MI/ RI+RNF130OE)组。 心肌缺血-再灌注 24 h 后,通过心脏超声检测小鼠心功能,采用 IHC、DHE 和 TUNEL 染色观察各组心肌组织的病理变化、氧化损伤和细胞凋亡,Western blot、免疫荧光和免疫组化检测蛋 白表达情况。 蛋白质组学分析 RNF130 调控的下游蛋白,通过免疫沉淀(IP)实验检测蛋白互作。
结果 与给 予 Vector 空载体质粒的模型组小鼠相比,小鼠心肌细胞 RNF130 过表达后,心脏功能显著改善,表现为左室射 血分数(EF)和左室短轴缩短率(FS)的数值增加,同时心肌梗死区域显著缩小,NOX-2 与 BAX 蛋白的表达水 平也观察到明显的下降(P<0. 05)。 DHE 和 TUNEL 染色表明,RNF130 过表达后,相比于 MI/ RI+Vector 组的 小鼠,其心肌细胞氧化损伤和细胞凋亡率明显降低(P<0. 05)。 蛋白质组学分析与 IP 实验发现蛋白 PARP1 与 RNF130 有明显的蛋白互作。 同时发现其与 RNF130 蛋白的表达变化相反。
结论 RNF130 可能通过调控 PARP1 泛素化途径减轻 MI/ RI 损伤,为靶向干预提供了新方向。
