目的 利用卡泊三醇( MC903)、2,4-二硝基氯苯( DNCB)、恶唑酮( OXA) 三种药物诱导 BALB/ c 小鼠特应性皮炎(AD)样改变,并初步探索不同小鼠模型的铁死亡情况。
方法 根据不同造模部位 (耳朵及背部皮肤),将健康 7 周龄雌性 BALB/ c 小鼠随机分为 8 组,即对照耳/ 背组、MC903 耳/ 背模型组、 DNCB 耳/ 背模型组、OXA 耳/ 背模型组,每组 8 只,分别给予相应浓度药物涂抹至相应部位造模。 MC903 连续 诱导 14 d;DNCB 与 OXA 连续致敏 3 d,致敏完成后间隔 4 d,于实验第 8 天起,每 2 d 于小鼠造模区域涂抹药 物激发,共激发 12 次,于实验第 30 天时完成激发。 观察小鼠造模后的皮损情况,测量皮肤厚度,检测血浆中 ROS、IL-4、IFN-γ、MDA 细胞因子,对皮肤进行病理组织学染色和电镜超微结构观察,Western Blot 检测铁死亡 有关蛋白(GPX4、FTH1、ACSL4、TfR1)的表达情况。
结果 与各对照组相比,三种药物造模后小鼠皮肤均出 现明显红肿、抓挠脱屑、皮肤粗糙增厚;模型组小鼠皮肤厚度均极显著增加(P < 0. 01);各模型组小鼠 ROS、 IFN-γ、IL-4、MDA 水平均不同程度升高(P < 0. 05);病理结果显示模型小鼠皮损表皮增厚,表皮细胞变性、坏 死、真皮层增厚且伴不同程度毛细血管淤血扩张、淋巴细胞和肥大细胞浸润等病理改变;透射电镜观察到皮肤 细胞内线粒体质膜断裂,膜密度增加,膜嵴减少和断裂等铁死亡改变;铁死亡相关蛋白 GPX4、FTH1 表达量显 著下调(P < 0. 05),ACSL4、TfR1 表达量显著上调(P < 0. 05)。
结论 三种药物不同造模部位均成功构建出 AD 样改变小鼠模型,铁死亡参与了 AD 样小鼠模型的病理过程,但不同药物诱导及造模部位之间存在异 质性。
