目的 从“以方测证”的中医证候角度,探讨围绝经期干眼肝肾阴虚证大鼠模型的建立。
方法 30 只 SPF 级 SD 雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、杞菊地黄汤组,每组 10 只。 除假手术组外,其余 2 组大 鼠行双侧卵巢切除,并予以 0. 1%苯扎氯铵滴眼液滴眼联合激怒法持续 10 周建立围绝经期干眼肝肾阴虚证模 型。 造模结束后,杞菊地黄汤组大鼠予以杞菊地黄汤按 8. 37 g / (kg·d)的剂量进行灌胃,假手术组和模型组 大鼠按 1 mL / 100(g·d)灌胃生理盐水,持续 21 d。 观察并记录各组大鼠的一般情况、网屏实验评分、泪液分 泌量、泪膜破裂时间、角膜荧光素染色;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清促卵泡生成素(FSH)、雌二 醇(E2 )和孕酮(PROG)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠角膜、泪腺病理损伤;免疫组化染色检测大鼠角 膜中炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。
结果 与假手术组对比,模型组大鼠在行 为学上表现为行动迟缓、反应迟钝、易激怒、体质量减轻、肛温上升( P < 0. 05),网屏实验评分下降( P < 0. 05),泪液分泌量减少(P < 0. 05),泪膜破裂时间缩短(P < 0. 05),角膜及泪腺病理损伤严重,血清性激素 FSH 水平升高,E2 、PROG 水平下降(P < 0. 05),泪腺炎性因子 IL-1β、TNF-α 表达增加;与模型组比较,杞菊地 黄汤组上述各指标均显著改善。
结论 从“以方测证”的中医证候角度,成功建立了围绝经期干眼肝肾阴虚 证病证结合大鼠模型,为今后围绝经期干眼方证对应机制的系统深入研究提供了理论和实验依据。