目的 通过不同的肾脏切除手术方法建立SD大鼠慢性肾脏病主动脉钙化模型，并进行手术时间及存活时 间比较和效果评价，以探索更优化的建模方法。
方法 根据不同手术方式分为腹腔入路先切2/3左肾后二期右全肾 切除组 （A组）、腹腔入路2/3左肾及右全肾同时切除组 （B组）、背入路先切右全肾后二期2/3左肾切除组 （C组）、 背入路先切2/3左肾后二期切除右全肾组 （D组） 共4组，比较腹腔入路及背入路、分期及一次性肾脏切除术的SD 大鼠生存曲线确定最优的肾脏切除手术方式后，选取24只8周龄雄性SPF级SD大鼠进行肾脏切除联合骨化三醇钙 化诱导：其中实验组12只大鼠行背入路的左侧2/3肾切除后右侧全肾切除术，1周后腹腔注射骨化三醇溶液1 μg/kg， 以进行主动脉钙化诱导；对照组12只大鼠行假手术后1周，腹腔注射含1%DMSO的生理盐水250 μL/kg。腹腔注射 药物3个月后，观察各组大鼠的存活情况。麻醉状态下，采集各组大鼠的血液样本，测定血清磷和钙离子浓度、血 清尿素氮和肌酐含量。安乐死大鼠后进行剖检，肉眼观察残余肾脏形态，HE染色观察肾冠状切面的病理学变化。 另外取各组大鼠的全主动脉，茜素红S及von Kossa染色观察主动脉钙化程度，实时荧光定量PCR法检测大鼠主动 脉组织中平 滑 肌 肌 动 蛋 白 相 关 蛋 白 α （smooth muscle actin-associated protein α ，Sm22）、Runt 相 关 转 录 因子 2 （Runt-related transcription factor 2，Runx2）、骨桥蛋白 （osteopontin ，OPN） 基因表达情况，以评价建 模效果。
结果 不同术式优化探索实验发现，背入路先切除2/3左肾再切除右侧全肾的D组大鼠的存活率最高，提 示该术式是建立肾功能不全的慢性肾脏病模型的最佳手术方式。运用该术式联合高剂量骨化三醇注射的实验组大鼠 血清钙离子浓度显著低于假手术对照组 （P＜0.05），而血清磷离子浓度、血清肌酐及血清尿素氮含量则显著高于对 照组 （P＜0.05）。肾脏HE染色可见实验组大鼠肾脏发生明显器质性改变，其中实验组大鼠的肾小球计数比对照组 明显减少 （P＜0.05），提示肾衰竭模型成功建立。茜素红S染色可见实验组大鼠的主动脉中膜中有明显的色素沉 着，von Kossa染色可见实验组大鼠的主动脉中膜层明显有硝酸银沉积，符合肾衰竭主动脉钙化的表现。实时荧光 定量PCR表明，实验组大鼠的主动脉组织中Sm22表达水平下降（P＜0.05），OPN和Runx2表达水平上升（P＜0.05）， 提示主动脉平滑肌细胞由平滑肌表型向骨样表型转变，主动脉钙化模型诱导成功。
结论 采用背入路先切除2/3左 肾，再进行右侧全肾切除，联合高剂量骨化三醇溶液摄入的方法，可成功建立SD大鼠慢性肾脏病主动脉钙化模型。 该方案能缩短手术时间，提高建模成功率和动物存活率。
