目的 建立食蟹猴 FABP4 基因 mRNA 表达水平检测方法。
方法 根据脂肪 FABP4 基因 mRNA序列设计实时荧光定量PCR( RT-qPCR)引物6对;活体采集食蟹猴脂肪组织;提取组织总RNA ,并逆转录为cDNA;采用所设计的6对引物进行RT-qPCR检测,根据扩增曲线、熔解峰,挑选出检测最灵敏、无非特异性扩增的引物;以 100、 10-1、 10-2、 10-3、 10-4倍稀释cDNA ,构建基因表达的标准曲线;设置食蟹猴青年组和老年组两个组别,验证食蟹猴脂肪FABP4基因表达的RT-qPCR检测方法。
结果 筛选出了检测灵敏度最高的一对引物,建立了食蟹猴脂肪组织FABP4基因表达水平RT-qPCR检测方法;老年组食蟹脂肪FABP4基因相对表达量高于青年组。
结论 成功建立了检测食蟹猴FABP4基因转录水平的RT-qPCR方法。
