目的 探究果糖对小鼠原代肝细胞脂质沉积的影响及亮氨酸羧基甲基转移酶 １（ＬＣＭＴ１）敲除 的干预作用。
方法 采用肝门静脉二步灌流法，提取野生型（ＷＴ）及肝细胞特异性 ＬＣＭＴ１ 敲除（ＫＯ）小鼠的 原代肝细胞；将细胞分为 ４ 组：ＷＴ－对照组、ＷＴ－果糖组、ＫＯ－对照组、ＫＯ－果糖组；采用刃天青检测细胞活性， ＡＬＴ、ＡＳＴ 试剂盒检测细胞损伤，油红 Ｏ 染色、脂滴绿色荧光染色观察细胞内脂质沉积情况，甘油三酯试剂盒 检测细胞内脂质含量，实时荧光定量 ＰＣＲ 检测脂代谢相关基因表达，免疫印迹检测 ＬＣＭＴ１、ＰＰ２Ａｃ 相关蛋白 的表达水平。
结果 果糖处理后，各组肝细胞活性无显著变化，肝细胞无明显损伤（Ｐ＞０. ０５）。 与 ＷＴ－对照 组比，ＷＴ－果糖组油红 Ｏ 染色和脂滴绿色荧光染色显示脂滴显著增多（均 Ｐ＜０. ００１），甘油三酯含量显著升高 （Ｐ＜０. ０５），脂质从头合成基因 ＣｈＲＥＢＰ、ＳＲＥＢＰ⁃１ｃ、ＡＣＣ１ 的 ｍＲＮＡ 表达显著上升（ Ｐ＜ ０. ０５，Ｐ＜ ０. ００１，Ｐ＜ ０. ００１），ＦＡＳ 表达无明显变化（Ｐ＞０. ０５）；脂质摄取基因 ＦＡＢＰ１、ＦＡＴＰ２ 的 ｍＲＮＡ 表达显著升高（Ｐ＜０. ０５，Ｐ＜ ０. ０５）。 与 ＷＴ－果糖组比，ＫＯ－果糖组油红 Ｏ 染色和脂滴绿色荧光染色显示脂滴显著减少（ Ｐ＜ ０. ０１，Ｐ＜ ０. ００１），甘油三酯含量显著降低（Ｐ＜０. ０５），脂质合成基因 ＣｈＲＥＢＰ、ＳＲＥＢＰ⁃１ｃ、ＡＣＣ１ 的 ｍＲＮＡ 表达显著下降 （Ｐ＜０. ０１，Ｐ＜０. ００１，Ｐ＜０. ００１），脂质摄取基因 ＦＡＢＰ１、ＦＡＴＰ２ 的 ｍＲＮＡ 表达显著降低（Ｐ＜ ０. ００１，Ｐ＜ ０. ０５）， ＣＰＴ１ 的 ｍＲＮＡ 表达显著增加（Ｐ＜０. ０１）。 免疫印迹结果显示，与 ＷＴ－对照组相比，ＷＴ－果糖组总 ＰＰ２Ａｃ 表达 显著升高（Ｐ＜０. ０５）、ＰＰ２Ａｃ 去甲基化显著降低（Ｐ＜０. ０１），ＫＯ－对照组总 ＰＰ２Ａｃ 表达无明显变化（Ｐ＞０. ０５）、 ＰＰ２Ａｃ 去甲基化显著升高（Ｐ＜０. ００１）。 ＫＯ－果糖组较 ＷＴ－果糖组总 ＰＰ２Ａｃ 表达显著降低（Ｐ＜０. ０５）、ＰＰ２Ａｃ 去甲基化蛋白表达水平显著升高（Ｐ＜０. ０１）。
结论 ＬＣＭＴ１ 敲除通过抑制脂质摄取、增强脂肪酸氧化及下调 脂质从头合成改善果糖诱导的原代肝细胞脂质沉积，其机制与 ＬＣＭＴ１ 敲除上调 ＰＰ２Ａｃ 去甲基化水平改变 ＰＰ２Ａ 活性有关。
