目的 探讨“三法三穴”推拿通过延缓失神经肌萎缩改善坐骨神经损伤( SNI)大鼠运动功能的机制。
方法 将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、推拿组,每组9只。 模型组、推拿组采用钳夹法建立SNI模型;假手术组仅暴露坐骨神经,不夹持。 于术后第7天起,对推拿组大鼠进行干预。 使用智能推拿手法模拟仪,依次于殷门、承山、阳陵泉施以点法、拨法及揉法。 各穴位每种手法操作 1 min ,每天治疗1次。 完成10次干预后休息1 d ,随后继续进行为期10 d 的相同干预;假手术组与模型组大鼠仅接受等时长的抓握固定处理;正常组维持常规饲养状态。 分别于造模前、干预 10次、 20次后测量后肢抓力以评价肌力。 推拿20次结束后处死大鼠并取材,采用HE染色法观察大鼠右侧腓肠肌萎缩情况并测定肌纤维横径面积;RT-qPCR技术检测右侧腓肠肌组织CCNB1、 CNTF、 MEF2A mRNA表达;Western blot检测右侧腓肠肌组织 PAX3、 Desmin、 HGF蛋白表达;免疫荧光法检测患侧腓肠肌MEF2C 的蛋白表达。
结果 与正常组、假手术组相比,模型组大鼠后肢抓力显著降低( P<0 . 01) ;模型组大鼠肌纤维排列紊乱,肌细胞明显萎缩,横截面积显著降低( P<0 . 01) ,CCNB1、 CNTF、 MEF2A mRNA及PAX3、 Desmin、 HGF、 MEF2C蛋白的表达低于正常组及假手术组( P<0 . 05) ;与模型组相比,推拿组大鼠后肢抓力显著提升( P< 0 . 01) ,肌纤维虽有萎缩,但肌纤维排列有序,未见明显紊乱,横截面积显著升高( P<0 . 01) ,CCNB1、 CNTF、 MEF2A mRNA及PAX3、 Desmin、 HGF、 MEF2C 蛋白的表达显著上调( P< 0 . 05)。
结论 “ 三法三穴” 推拿可促进 CCNB1、 CNTF、 MEF2A mRNA 及 PAX3、 Desmin、 HGF、 MEF2C蛋白的表达,促进肌卫星细胞增殖分化及修复神经损伤延缓失神经肌萎缩,改善SNI大鼠运动功能。
