目的 研究聚焦于张力蛋白 1 ( TNS1)和miR-574-5p在心脏骤停中的调控关系及其临床意义,验证靶向抑制miR-574-5p 的治疗潜能。
方法 构建氧糖剥夺/复氧( OGD/ R)心肌细胞模型和小鼠窒息性心脏骤停/心肺复苏( ACA/ CPR)模型。 采用RT-qPCR检测miR-574-5p和TNS1 的表达水平;使用Wester blot检测心肌细胞中TNS1蛋白的表达水平;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-574-5p与TNS1 的靶向关系;应用CCK-8检测细胞活力;采用流式细胞术检测细胞凋亡;通过ELISA法检测血清中心肌损伤标志物cTnI和氧化应激标志物MDA、 4-HNE 的水平;使用血流动力学监测系统评估心功能指标dp/ dtmin和dp/ dtmax ;通过超声心动图测定LVEF和LVFS等心功能参数。
结果 OGD/ R处理可显著上调心肌细胞中miR-574-5p 的表达并抑制TNS1 mRNA和蛋白的表达( P<0 . 05)。 抑制miR-574-5p可改善心肌细胞存活率并减轻氧化应激损伤( P <0 . 05)。 在ACA/ CPR模型中,miR-574-5p antagomir组显著改善心功能指标( P<0 . 05) ,降低心肌损伤和氧化应激标志物水平( P<0 . 05) ,同时逆转了心肌组织中miR-574-5p上调和 TNS1下调的表达模式( P< 0 . 05)。
结论 本研究证实靶向抑制miR-574-5p可通过上调TNS1 的表达改善心功能,为心脏骤停后的心肌保护提供了新的治疗靶点。
