目的 基于炎症性肠病( IBD)的病理机制与核因子κB( NF-κB)信号通路的过度激活及巨噬细胞M1型极化密切相关,利用比较研究探索IBD疾病过程中康复新液对NF-κB通路及巨噬细胞M1型极化的调节机制。
方法 通过硫酸葡聚糖钠( DSS)诱导构建小鼠 IBD 模型,将48 只 C57BL/ 6 小鼠分为对照( Control)、模型( Model )、柳氮磺吡啶( SASP )、康复新液低剂量( 5 mL/ kg , KFX-L )、康复新液中剂量(10 mL/ kg ,KFX-M)、康复新液高剂量(20 mL/ kg ,KFX-H)、 NF-κB抑制剂预处理( NF-κBi-pretreated)及NF-κB 抑制剂预处理+康复新液高剂量( NF-κBi-pretreated+KFX-H)组,共8组。 记录其疾病活动指数( DAI)、结肠黏膜损伤指数( CMDI)、组织病理学评分,同时还利用RT-qPCR法检测结肠组织CD86、肿瘤坏死因子-α ( TNF-α )、磷酸化IκBα( p-IκBα)和IL-1β 的mRNA表达水平,蛋白免疫印迹( Western blot )法检测结肠组织CD86、 iNOS、 p-IκBα 的蛋白表达水平,流式细胞术分析康复新液对疾病模型的影响。
结果 DSS诱导成功构建了小鼠IBD模型,各项研究指标的测得值均在Model组最高( P< 0 . 05)。 药物干预后,除SASP 组CD86下调程度较小并与Model组比较差异无统计学意义( P >0. 05)外,各组的各项指标与 Model 组比较均显著降低( P < 0. 05) ,而康复新液干预的3组中以KFX-H组的指标下调最为明显( P<0 . 05) ,但NF-κB抑制剂与高剂量康复新液联合干预后并未明显增加疗效,各指标测得值与药物单独干预各组间的差异无统计学意义( P >0. 05)。
结论 康复新液、柳氮磺吡啶和NF-κB抑制剂对DSS诱导的IBD模型小鼠结肠炎症均具有保护作用,但其作用机制存在差异。 康复新液与NF-κB抑制剂可通过降低IκBα磷酸化水平抑制NF-κB通路活化,并下调巨噬细胞M1型极化,从而协同减轻肠道炎症反应;而柳氮磺吡啶对巨噬细胞M1极化的影响较弱。
