目的 研究 3 种经典蒙药当贡-3(DG-3)、赞丹-3(ZD-3)、匝迪-5(ZD-5)对心肌缺血再灌注 损伤(MIRI)小鼠的保护作用,比较 3 种蒙药对 MIRI 的作用效果。
方法 采用 7 周龄雄性 C57BL / 6 小鼠,随 机分为 6 组:假手术(Sham)组、模型(Model)组、复方丹参滴丸(CDDP)阳性对照组、当贡-3(DG-3)组、赞丹- 3(ZD-3)组及匝迪-5(ZD-5)组,造模前 14 d 灌胃给药。 采用可逆性冠状动脉左前降支结扎(LAD)法造模,持 续监测小鼠心电图 ST 段情况,各组小鼠缺血 20 min,于再灌注 24 h 或 7 d 后处死。 监测小鼠心电图 ST 段判 断 MIRI 造模与恢复情况;TTC 染色观察心肌梗死面积;苏木精-伊红(HE)染色与马松(Masson)染色观察小 鼠心脏缺血区域的病理炎症变化;TUNEL 细胞凋亡染色判断组织细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验(ELISA) 检测血清中的小鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)因子水平;活性检测试剂盒检测血清中的乳酸脱氢酶(LDH)、超 氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;体外细胞实验,通过细胞增殖和细胞毒性(CCK-8)检测 3 种蒙 药对经氧糖剥夺/ 再灌注(OGD/ R)处理后的人心肌细胞(AC16)细胞活力的影响。
结果 心电图检测发现, 再灌注期平均心率高于缺血期,出现 MIRI;与模型组相比,ZD-3、DG-3、ZD-5 组的 TTC 染色结果显示小鼠心肌 梗死面积减少(P<0. 05);HE 和 Masson 染色结果表明,给予蒙药后不同程度的减少炎症细胞的募集、减轻心 肌组织纤维化程度(P<0. 05);TUNEL 细胞凋亡检测结果表明 ZD-3 组的凋亡显著减少(P<0. 001);ZD-3 组血 清中 CK-MB 水平显著降低(P<0. 01);此外,检测 MIRI 后 24 h 与 7 d 的心肌酶谱 LDH 与氧化应激指标 SOD、 MDA,表明在造模前、后给予 ZD-3、DG-3、ZD-5 均可降低 LDH 活性(P<0. 05),ZD-3 与 DG-3 组可减少氧化应 激因子的产生(P<0. 01);最后,体外实验检测细胞活性,ZD-3 与 ZD-5 组可提高 AC16 细胞 OGD/ R 后细胞存 活率(P<0. 05)。
结论 蒙药 DG-3、ZD-3 和 ZD-5 对小鼠 MIRI 均具有保护作用,其中 ZD-3 的心脏保护作用较 好,其机制与减少炎症细胞浸润及减轻心脏组织纤维化程度密切相关。 本实验条件下,初步认为 ZD-3 是可以 有效抑制 MIRI 的治心蒙药。
