本栏目上期文章《非动物实验替代知多少》系统介绍了目前非动物实验替代的方法及其适用范围。本文将详细介绍其中的皮肤致敏“定义性方法”（即TG 497），以期让读者进一步了解动物实验替代的这一里程碑，以及现阶段动物实验完全被替代的重要突破与潜在困境。
2021年，经济合作与发展组织（Organisation for Economic Co-operation and Development，OECD）正式发布了一项具有里程碑意义的测试指南（test guideline，TG）497，首次将一套完整的综合体外测试方案纳入国际毒理学评价体系。该方案用于化学物质的皮肤致敏性评估，被视为可完全替代动物实验的方法。随后，OECD于2022年又发布了另一项综合体外测试方案TG 467，用于眼部腐蚀与刺激的风险评估。尽管目前仅有这两项指南作为完全替代相应动物实验的方案被纳入官方毒理测试评价体系，但它们的推出仍标志着在部分领域，非动物实验方法已由辅助性工具跃升为决策层面的主导手段，实现了特定毒理终点的完全替代。然而正如TG 497的成功案例所揭示的那样，实现对动物实验完全替代的道路并非坦途——每一个被采纳的替代方案都需要在对生物机制深入理解的基础上，实现方法的标准化，完成多中心验证，确保替代方案与人体真实反应保持高度一致。因此，目前成功替代动物实验的多是个别突破，而非普遍现象。
