目的 为模式小鼠基因型批量鉴定工作建立高效的 ＤＮＡ 提取方法。
方法 以鼠尾组织为实 验材料，采用碱煮简化法、碱煮常规法、蛋白酶 Ｋ 裂解法和 ＤＮＡ 提取试剂盒 ４ 种方法提取模式小鼠 ＤＮＡ，测 定 ＤＮＡ 模板纯度、浓度，评价凝胶电泳图的优劣，并比较 ４ 种方法所耗时长及实验成本。
结果 蛋白酶 Ｋ 裂 解法提取的 ＤＮＡ 浓度最高，碱煮简化法和常规法次之；试剂盒处理所得的 ＤＮＡ 纯度较高，碱煮简化法次之。 ４ 种方法处理所得的 ＤＮＡ 模板通过聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增、凝胶电泳后均可得到 清晰的 ＤＮＡ 目的条带。 此外，碱煮简化法提取的 ＤＮＡ 模板在－２０ ℃ 保存 １ 个月后仍可用于基因鉴定，且耗 时最少、成本最低。
结论 模式小鼠批量鉴定基因型时，碱煮简化法是目前最简便、最快捷、最经济的 ＤＮＡ 模 板提取方法。
阅读原文：模式小鼠批量鉴定方法的探讨.pdf
