目的 建立超氧化物歧化酶 1 ( SOD1)基因敲除大鼠,解析其行为学表型。
方法 采用 CRISPR/ Cas9技术构建SOD1敲除型大鼠,通过PCR及Sanger测序进行基因型鉴定,Western Blot验证SOD1 蛋白表达情况。 与野生型大鼠交配,评估基因型遗传稳定性。 动态监测体质量变化、生存率,系统评估组织病变、行为学异常、脊髓运动神经元数量变化及炎症变化情况。
结果 基因型鉴定确认SOD1敲除型大鼠模型制备成功。 SOD1基因缺失影响大鼠发育及体质量。 行为学显示敲除型大鼠表现出渐进性的运动共济失调,最终导致后肢瘫痪,伴随有脊髓L4 区运动神经元丧失,小胶质细胞显著增多、腓肠肌肌细胞数量与横截面积减少等肌萎缩侧索硬化症( ALS)疾病特征。
结论 本研究成功构建SOD1 敲除型大鼠模型,该模型能重现 ALS疾病的一些核心病理特征,为深入研究SOD1基因在ALS 中的功能提供了重要动物模型。
