目的 选用版纳微型猪近交系品系建立猪的同种异体肾脏移植手术技术体系,通过血常规检测、肝功能和 肾功能检测评估受体猪的生理指标和移植肾脏的功能,为同种异体肾移植手术模型的制备提供参考数据。
方法 本 研究共进行4例同种异体猪肾移植手术,其中1例为健康猪 (R) 接受单肾移植,2例为猪 (DR1和DR2) 单肾切除 后 肾 移 植,另 1 例 为 猪 (DR3) 双 肾 切 除 后 肾 移 植。肾 移 植 术 前,采 用 交 叉 配 血 和 补 体 依 赖 的 细 胞 毒 性 (complement-dependent cytotoxicity,CDC) 实验对供体猪与受体猪进行配型。肾移植术后,定期采集猪外周血 样本进行血常规、肝功能和肾功能检测,并通过彩色多普勒超声技术检测移植肾的血流供应情况。实验到达终点 后,剖取猪DR1双肾和猪DR3左肾并进行苏木精-伊红 (hematoxylin-eosin,HE) 染色,以评估未移植肾和移植肾 的病理变化。
结果 受体猪DR1和DR3分别于术后17 d和30 d死亡,受体猪R和DR2在为期30 d的观察期内,状 况良好。肝功能和肾功能检测结果显示,猪DR1术后1 d,丙氨酸氨基转移酶 (alanine aminotransferase,ALT) 水 平 升 高 (>1 000 U/L), 术 后 7 d 达 到 高 峰 (1 300 U/L), 术 后 1 d 天 门 冬 氨 酸 氨 基 转 移 酶 (aspartate aminotransferase,AST)即达到高峰(>3 000 U/L),术后17 d时ALT和AST的含量仍处于较高水平(ALT,500 U/L; AST,700 U/L);猪 R、DR2 和 DR3 的 ALT 和 AST 的含量均于 17 d 左右恢复到正常水平。猪 R 血清中的肌酐 (creatinine,Crea) 含量较为稳定,术后未有上升;猪DR1和DR2的Crea含量在术后第1天时有一过性升高,之 后逐渐恢复到正常水平 (<100 μmol/L);猪 DR3 的 Crea 水平在术后 2~10 d 均低于 500 μmol/L,术后 11~28 d 间 Crea 含量升高,最高达到 1 500 μmol/L,表明其肾脏逐渐失去功能。超声结果显示,受体猪 R 的术前阻力指数 (resistive index,RI) 为0.91,术后24 d肾皮质、髓质血流信号丰富,RI值为0.88,与未移植前的RI值接近。猪 DR2术后17 d时的RI值为0.89,肾皮质血流较差,肾髓质较好。猪DR1在术后17 d时,移植肾中未检测到血流信 号。HE染色结果显示,猪DR1未移植的健康右肾结构正常,移植的左肾肾小球结构模糊,细胞核溶解,表明左肾 在取出之前已失去功能。猪DR3移植的左肾肾小球和肾小管中可见大量红细胞和淋巴细胞浸润,表明该肾脏移植后 可能出现了凝血功能异常和排斥反应。
结论 本研究以版纳微型猪近交系为实验动物,实施了4例猪-猪的同种异体 肾移植手术,术后借助血常规、肝功能、肾功能、彩色多普勒超声以及病理学检测,对受体猪的生理指标和移植肾 脏的功能展开监测。本研究构建的猪-猪同种异体肾移植技术体系,可为临床医生开展肾移植手术奠定基础。



