目的 探讨玉朗伞查尔酮( YLSC)对血管紧张素II( Ang II)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及可能机制。
方法 将H9c2心肌细胞分为空白对照组、模型组、 YLSC低、中、高剂量组, YLSC干预后,以浓度为 1 μmol/ L 的Ang II诱导细胞损伤模型。 细胞计数法( CCK-8)检测细胞活力,单丹磺酰尸胺染色法( MDC)检测细胞自噬体的形成,2 ,7-二氯荧光素二乙酸酯( DCFH-DA)荧光探针法检测细胞活性氧( ROS)水平,Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡,酶联免疫吸附测定法( ELISA)检测心肌细胞三磷酸腺苷( ATP)含量,逆转录聚合酶链式反应法( RT-PCR)检测Bcl2-腺病毒E1B 19 kDa相互作用蛋白3 ( Bnip-3)及自噬相关蛋白 5 ( Atg5)水平,蛋白免疫印迹法( Western blot )检测自噬标记蛋白 p62、 Beclin 1 及 LC3II/ LC3I 表达。
结果 YLSC能减轻Ang II诱导的H9c2心肌细胞损伤,CCK-8检测提示YLSC能提高心肌细胞的活力( P< 0 . 05或P <0 . 01) ,MDC染色法提示YLSC能促使自噬体形成,DCFH-DA荧光探针法检测结果显示YLSC能减少ROS 的生成( P<0 . 01) ,Hoechst 33342染色法检测结果显示YLSC 能减少细胞凋亡( P< 0 . 01) , ELISA检测结果显示 YLSC能提高细胞ATP水平( P<0 . 05或P<0 . 01) ,RT-PCR检测结果显示YLSC能促进Bnip-3和Atg5 的基因表达( P<0 . 05或P<0 . 01) ,Western blot检测结果显示YLSC能降低p62 的表达并提高Beclin 1及LC3II/ LC3I 的表达( P<0 . 05或P<0 . 01)。
结论 YLSC能有效抑制Ang II诱导的 H9c2心肌细胞损伤及凋亡,其机制可能与启动心肌自噬程序、激活自噬相关因子表达以及清除凋亡细胞等有关。
