目的 探讨 Ran 蛋白微管组织中心结合蛋白(RANBP9) 靶向调控转化生长因子 β1( transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)的表达,及其对结直肠癌 Colo320 细胞凋亡的影响。

方法 分析 TCGA 数据库中 625 例结 肠癌组织以及 20 例正常结肠组织中 RANBP9 的表达数据,KMPLOT 分析 RANBP9 的表达与结肠癌患者生存期的关 系。 人类蛋白免疫组化数据库分析 TGF⁃β1 在正常结肠组织和结肠癌组织中的表达情况,使用 UALCAN 数据库分 析 TGF⁃β1 的表达与结肠癌患者生存期的关系。 双荧光素酶实验分析 RANBP9 和 TGF⁃β1 的关系。 将 pcDNA3. 1⁃ GFP⁃RANBP9 和 pcDNA3. 1⁃GFP⁃RANBP9⁃NC 分别转染至实验组和对照组细胞中,转染完成后细胞常规培养,另设 立正常组细胞,不经过转染操作,常规培养;噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法检测各组细胞的生长 活力,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,JC⁃1 染色检测各组细胞的线粒体膜电位,Western blot 检测各组细胞中 RANBP9 和 TGF⁃β1 的表达。

结果 RANBP9 在结肠癌组织中的表达明显降低,与 RANBP9 表达低的患者相比, RANBP9 高表达的结肠癌患者具有较高的生存期曲线,TGF⁃β1 在结肠癌组织的表达明显升高,与 TGF⁃β1 表达高的 患者相比,TGF⁃β1 低表达的患者具有较高的生存期曲线,差异均具有统计意义(P<0. 05)。 在结肠癌中,RANBP9 能靶向调控 TGF⁃β1 的表达。 与正常组细胞相比,实验组细胞的生长活力、线粒体的膜电位、TGF⁃β1 的表达明显下 调,细胞的凋亡率和 RANBP9 的表达明显升高,差异均具有统计意义(P<0. 05)。

结论 RANBP9 能靶向调控 TGF⁃ β1 的表达,促使结肠癌细胞 Colo320 的生长活力和线粒体膜电位下降,诱导其凋亡。

阅读原文:RANBP9调控TGF⁃β诱导结肠癌Colo320细胞凋亡的机制研究.pdf